Thermo Scientific™ PscI (PciI) (10 U/l)

Beschreibung

Lambda-DNA, verdaut mit PscI (PciI), 0,7 % Agarose, 2 Spaltstellen

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

5'...A▵C A T G T...3'

3'...T G T A C▵A...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität

• 1x Puffer Tango:33 mM Tris-Acetat (pH 7,9 bei 37°C), 10 mM Mg-Acetat, 66 mM K-Acetat und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 37°C inkubieren

Lagerungspuffer

• PscI wird geliefert in:10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden

• Nach 50-fachem Verdau mit PscI können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: möglicherweise Überlappung — Auswirkung unbestimmt
• EcoBI: möglicherweise Überlappung — Auswirkung unbestimmt

Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA

• Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich

Kompatible Enden

• AflIII, BtgI, Eco130I, FatI, NcoI, PagI

Hinweis:

PscI wird wie seine Isoschizomere BspLU11I und PciI durch die nicht-ionischen Detergenzien Triton X-100 (>0,002 %) und Nonidet P40 (>0,001 %) gehemmt.