Thermo Scientific™ SspI (10 U/l)

Beschreibung

Lambda-DNA verdaut mit SspI, 1 % Agarose, 20 Spaltungsstelle

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

3'...T T A▵T A A...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität

• 1x G-Puffer:10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl₂, 50 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA. Inkubieren bei 37°C

Lagerungspuffer

• SspI wird geliefert in:10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden

• Nach 10-fachem Verdau mit SspI können über 90 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoBI: kann überlappen — keine Auswirkung

Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA

• Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich

Hinweis:

Ein mehr als 10-facher Überverdau mit SspI kann zu Star-Aktivität führen.