Invitrogen™ eBioscience™ ELISA Ready-SET-Go!™ für humanes IL-1-beta Kit, 2. Generation

Beschreibung

Das unbeschichtete ELISA-Kit für humanes Interleukin-1beta (IL-1β) enthält vorab aufeinander abgestimmte Antikörperpaare, Platten und Reagenzien für quantitative Enzyme-Linked Immunosorbent-Assays (ELISA) zum Nachweis und zur Quantifizierung der Konzentration des humanen Proteins IL-1β.Waschpuffer und Stopplösung sind für die Durchführung der ELISA-Reaktion erforderlich und separat erhältlich.Funktionsprinzip der Methode ELISAs sind zur Messung der Zielmenge bestimmt, die zwischen einem zusammenpassenden Antikörperpaar gebunden ist.Ein zielspezifischer Antikörper wird über Nacht auf den Boden der Wells einer Mikrotiterplatte beschichtet.Proben, Standards oder Kontrollen werden dann in diese Wells gegeben und binden an den immobilisierten Antikörper (Capture).Durch Zugabe des zweiten (Detektor-)Antikörpers entsteht ein Sandwich, dann wird eine Substratlösung hinzugefügt, die mit dem Enzym-Antikörper-Zielkomplex reagiert, um ein messbares Signal zu erzeugen.Die Intensität dieses Signals ist direkt proportional zur Konzentration des in der Originalprobe vorhandenen Ziels.

Interleukin-1-beta (IL-1-beta) ist ein proinflammatorisches Zytokin, das von Monozyten, Makrophagen und dendritischen Zellen exprimiert wird. IL-1 beta wird als Reaktion auf entzündliche Reize als inaktive Vorform von 31 kDa synthetisiert, die sich im Zytosol anreichert. Die Spaltung von pro-IL-1-beta in das aktive 17 kDa-Protein erfordert die Aktivierung von Inflammasomen, Multiprotein-Komplexe, die auf Pathogene, Stressbedingungen und andere Gefahrensignale reagieren. Die Aktivierung des Inflammasoms löst die Verarbeitung des Caspase-1-Vorläufers in seine aktive Form aus, die wiederum pro-IL-1-beta spaltet. IL-1 beta fehlt ein Signalsequenz-Peptid für den klassischen ER/Golgi-Weg. Es wird neben Caspase-1 über einen wechselnden und noch nicht vollständig bekannten Mechanismus sezerniert. Obwohl IL-1-beta am häufigsten in seiner aktiven Form sezerniert wird, kann unter bestimmten biologischen Bedingungen eine Sekretion des ungespaltenen Proteins nachgewiesen werden. Il-1-beta signalisiert über zwei Rezeptoren, IL-1RI und IL-1RII, die beide gemeinsam mit IL-1 alpha genutzt werden. Die IL-1 beta-Aktivität kann durch den IL-1-Rezeptorantagonisten (IL-1RA) moderiert werden. Das ist ein Protein, das von vielen Zelltypen produziert wird und die Rezeptorbindung durch kompetitive Hemmung blockiert. IL-1 beta spielt eine wichtige Rolle bei der angeborenen Wirtsabwehr, indem die Produktion in Zielzellen eingefügt sowie Akutphasen-Reaktionen auf Infektionen und Verletzungen ausgelöst wird. Erhöhte Konzentrationen von IL-1 beta wurden mit vielen chronisch-entzündlichen Erkrankungen assoziiert, wobei IL-1 beta Antikörper mit potenziell therapeutischer Bedeutung neutralisiert.