Invitrogen™ ELISA-Kit für humanes IL-1 beta, hohe Empfindlichkeit

Beschreibung

Dieses hochempfindliche ELISA für humanes Interleukin-1beta (Hu-IL-1β) quantifiziert Hu-HS-IL-1β in menschlichem Serum, Plasma, Urin oder Zellkulturmedium. Der Assay erkennt ausschließlich natürliches und rekombinantes Hu-HS-IL-1β. Verfahrensprinzip Der Festphasen-Sandwich-ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent-Assay) für Human-HS-IL-1β misst die Menge des Zieles, das zwischen einem zusammenpassenden Antikörperpaar gebunden ist. Ein zielspezifischer Antikörper wurde in den Wells der mitgelieferten Mikrotiterplatte vorbeschichtet. Proben, Standards oder Kontrollen werden dann in diese Wells gegeben und binden an den immobilisierten Antikörper (Capture). Ein spezieller Amplifikationsschritt ist erforderlich, um die hohe Empfindlichkeit zu erreichen. Nach Inkubations- und Waschschritten zur Säuberung der Mikrotiterplatte von ungebundenen Substanzen wird eine Substratlösung hinzugefügt, die mit dem Enzym-Antikörper-Zielkomplex reagiert, um ein messbares Signal zu erzeugen. Die Intensität dieses Signals ist direkt proportional zur Konzentration des in der Originalprobe vorhandenen Ziels. Strenge Validierung Jede hergestellte Charge dieses ELISA-Kits ist auf Kriterien wie Empfindlichkeit, Spezifität, Präzision und Chargenkonsistenz geprüft. Weitere Informationen zur Validierung werden in der Bedienungsanleitung angegeben.

Interleukin-1-beta (IL-1-beta) ist ein proinflammatorisches Zytokin, das von Monozyten, Makrophagen und dendritischen Zellen exprimiert wird. IL-1beta wird als Reaktion auf entzündliche Reize als inaktive Vorform von 31 kDa synthetisiert, die sich im Zytosol anreichert. Die Spaltung von pro-IL-1beta in das aktive 17 kDa-Protein erfordert die Aktivierung von Inflammasomen, Multiprotein-Komplexe, die auf Pathogene, Stressbedingungen und andere Gefahrensignale reagieren. Die Aktivierung des Inflammasoms löst die Verarbeitung des Caspase-1-Vorläufers in seine aktive Form aus, die wiederum pro-IL-1beta spaltet. IL-1beta fehlt ein Signalsequenz-Peptid für den klassischen ER/Golgi-Weg, es wird neben Caspase-1 über einen wechselnden und noch nicht vollständig bekannten Mechanismus sezerniert. Obwohl IL-1beta am häufigsten in seiner aktiven Form sezerniert wird, kann unter bestimmten biologischen Bedingungen eine Sekretion des ungespaltenen Proteins nachgewiesen werden. IL-1beta signalisiert über zwei Rezeptoren, IL-1RI und IL-1RII, die beide mit IL-1alpha geteilt werden. Die IL-1beta-Aktivität kann durch den IL-1-Rezeptorantagonisten (IL-1RA) moderiert werden, ein Protein, das von vielen Zelltypen produziert wird und die Rezeptorbindung durch kompetitive Hemmung blockiert. IL-1beta spielt eine wichtige Rolle bei der angeborenen Wirtsabwehr, indem es die Produktion anderer proinflammatorischer Zytokine in Zielzellen auslöst und Akutphasen-Reaktionen auf Infektionen und Verletzungen auslöst. Erhöhte Konzentrationen von IL-1beta wurden mit vielen chronisch-entzündlichen Erkrankungen assoziiert, wobei IL-1beta Antikörper mit potenziell therapeutischer Bedeutung neutralisiert.