Thermo Scientific™ Mutation Generation System Kit

Beschreibung

Die Transposon Produkte basieren auf dem Transpositionsmechanismus des Bakteriophages Mu. Während der lytischen Phase des Phagenlebenszyklus repliziert die Maschine ihr Genom, indem sie wiederholt in das Wirtsgenom transponiert. Die My-Transpositionsreaktion wurde zu einer In-vitro-Reaktion modifiziert, die durch ein einziges Enzym katalysiert wird – MuA Transposase. In diesem System ist eine einzige In-vitro-Reaktion in der Lage, mehr als eine Million Transposon-Insertionsklone zu erzeugen.

Besondere Merkmale

Das Mutation Generation System (MGS-Kit) und das Stop Generation System (STOP-Kit) sind für die Funktionsanalyse von Proteinen vorgesehen. Mit diesen neuen Transposon-Hilfsmitteln können gesättigte Bibliotheken von mutierten Proteinen in einer einzigen Reaktion mit kürzerer Arbeitszeit als bei jeder anderen Methode erstellt werden. Die Position der Transposon-Insertion in jedem mutierten Klon kann entweder durch PCR oder Sequenzierung abgebildet werden. Mit dem MGS-Kit und dem STOP-Kit liegen in nur 2 bis 3 Tagen Tausende mutierter Klone für Expressionsstudien vor.

Das MGS-Kit enthält den kompletten Satz an Reagenzien für die Transposon-basierte Linker-Scan-Mutagenese von Zielproteinen. Die MGS-Entranceposons dienen zur Vornahme subtiler Änderungen an der Struktur eines Zielproteins durch Einfügen von 15 bp In-Frame-Linkern in das entsprechende Zielgen. Diese In-Frame-Insertion ermöglicht die Konservierung nachgelagerter Sequenzen.

Die Entranceposons des STOP-Kits enthalten translationale Stopp-Codons in allen drei Leseframes innerhalb des terminalen Teils der Transposon-Sequenz. Die firmeneigene Modifikation des Stop Generation Systems ermöglicht es, aus praktisch jedem Zielprotein eine gesättigte C-Terminal-Deletionsbibliothek mit der Hinzufügung von maximal drei Aminosäuren zu erzeugen.

Besondere Eigenschaften

• Effizient – erstellen Sie gesättigte Insertionsbibliotheken für die Sequenzierung und Proteinanalyse in einer einzigen Reaktion
• Schnell – verringern Sie die Arbeitszeit im Vergleich zu herkömmlichen Methoden
• Zufällig – Eliminieren Sie die Präferenz für den Zielstandort oder Insertions-Hotspot