Macherey-Nagel™ Starterset B

Beschreibung

Das NucleoSpin™ Robot-8 Plasmid-Kit ermöglicht die vollautomatische Aufreinigung von Plasmid-DNA mit hoher Kopienzahl aus E. coli. Das einzigartige 8-Well-Streifen-Design ermöglicht die vollautomatische Trocknung des DNA-Bindungsmoduls vor dem Laden des Elutionspuffers und minimiert das Sprühen. DNA kann in Standard-96-Well-Mikrotiterplatten eluiert werden. Zusätzliches Zentrifugieren nach dem Elutionsschritt, damit sich die DNA im Well-Boden sammelt, ist nicht erforderlich. Das Kit enthält alle erforderlichen Laborartikel. Alternativ können MN-Röhrchenstreifen für die Elution verwendet werden. Das Roboterkit ermöglicht die schnelle Aufreinigung von bis zu 20 μg Plasmid-DNA pro Vorbereitung aus 1 bis 5 ml über Nacht in quadratischen Well-Platten oder Röhrchen angesetzten E. coli-Kulturen. Das Kit ist für die Verwendung von E. coli-Stämmen optimiert, die z. B. in LB, 2xYT oder TB-Medien mithilfe der mitgelieferten Kulturplatten kultiviert werden. Bakterienkulturen werden durch Zentrifugation pelliert und Zellen werden unter alkalischen Bedingungen lysiert. Es wird ein Puffer mit großen Mengen chaotroper Ionen hinzugefügt, um das Lysat zu neutralisieren und eine reversible Adsorption von DNA an die NucleoSpin™ Silika-Membran zu ermöglichen. Bakterielle Rohlysate werden mit den NucleoSpin™ Plasmid-Filterstreifen gereinigt und die Filtrate werden in den NucleoSpin™ Plasmid-Bindungsstreifen gesammelt. Verunreinigungen werden weggewaschen. Für E. coli-Wirtsstämme mit hoher endogener Nukleaseaktivität, die Long-Range-DNA-Sequenzierung und eine bessere Leistung entscheidender enzymatischer Reaktionen wird ein zusätzlicher Waschschritt mit Puffer AW empfohlen. Hochgradig reine Plasmid-DNA wird mit einem salzarmen Elutionspuffer (5 mM Tris/HCl, pH 8.5) oder Wasser (pH 8.0 bis 8.5) eluiert und ist direkt für nachfolgende Anwendungen gebrauchsfertig. Inhalt des Kits: NucleoSpin™ Plasmid-Filterstreifen, NucleoSpin™ Plasmid-Bindungsstreifen, quadratische Well-Blöcke für Zellkulturen, MN-Waschplatten, Elutionsplatten, Puffer, RNase A. NucleoSpin Robot-8 Plasmid-Kit, Isolierung von Plasmid-DNA, Puffer A1, A2, A3, AW, A4, AE, NucleoSpin Plasmid-Filterstreifen und Plasmid-Bindungsstreifen, Protokoll, Natriumhydroxidlösung. Weitere Informationen zu diesem Produkt erhalten Sie von Ihrem Kundendienst vor Ort.

• Silika-Membran-Technologie
• Elutionsvolumen: 75 μl bis 150 μl
• Ausbeute: 4 μg bis6 μg/ml E. coli
• Kulturvolumen: 1 bis 5 ml
• Bindungsvermögen: 20 μ g
• Maximale Plasmid-Größe < 15 kb
• Keine Verwendung organischer Lösungsmittel
• NucleoSpin 8-Well-Filterstreifen für die bequeme Filtration von bakteriellen Lysaten im Lieferumfang enthalten. Für die automatische Aufreinigung von Plasmid-DNA mit hoher Kopienzahl in kleinen Mengen aus E. coli in einem flexiblen 8-Well-Streifenformat.